共創共贏
在實際工作中，當我們(men) 拿到一個(ge) 樣品，我們(men) 該怎樣如何定性和定量，建立一套完整的分析方法是關(guan) 鍵，下麵介紹一些常規的步驟：
1、樣品的來源和預處理方法
GC能直接分析的樣品必須是氣體(ti) 或液體(ti) ，固體(ti) 樣品在分析前應當溶解在適當的溶劑中，而且還要保證樣品中不含GC不能分析的組分（如無機鹽），可能會(hui) 損壞色譜柱的組分。這樣，我們(men) 在接到一個(ge) 未知樣品時，就必須了解來源，從(cong) 而估計樣品可能含有的組分，以及樣品的沸點範圍。如能確認樣品可直接分析。如果樣品中有不能用GC直接分析的組分，或樣品濃度太低，就必須進行必要的預處理，包括采用一些預分離手段，如各種萃取技術、濃縮和稀釋方法、提純方法等。
2、確定儀(yi) 器配置
所謂儀(yi) 器配置就是用於(yu) 分析樣品的方法采用什麽(me) 進樣裝置、什麽(me) 載氣、什麽(me) 色譜柱以及什麽(me) 檢測器。
3、確定初始操作條件
當樣品準備好，且儀(yi) 器配置確定之後，就可開始進行嚐試性分離。這時要確定初始分離條件，主要包括進樣量、進樣口溫度、檢測器溫度、色譜柱溫度和載氣流速。進樣量要根據樣品濃度、色譜柱容量和檢測器靈敏度來確定。樣品濃度不超過mg/mL時填充柱的進樣量通常為(wei) 1-5uL，而對於(yu) 毛細管柱，若分流比為(wei) 50：1時，進樣量一般不超過2uL。進樣口溫度主要由樣品的沸點範圍決(jue) 定,還要考慮色譜柱的使用溫度。原則上講，進樣口溫度高一些有利，一般要接近樣品中沸點zui高的組分的沸點，但要低於(yu) 易分解溫度。
4、分離條件優(you) 化
分離條件優(you) 化目的就是要在zui短的分析時間內(nei) 達到符合要求的分離結果。在改變柱溫和載氣流速也達不到基線分離的目的時，就應更換更長的色譜柱，甚至更換不同固定相的色譜柱，因為(wei) 在GC中，色譜柱是分離成敗的關(guan) 鍵。
5、定性鑒定
所謂定性鑒定就是確定色譜峰的歸屬。對於(yu) 簡單的樣品，可通過標準物質對照來定性。就是在相同的色譜條件下，分別注射標準樣品和實際樣品，根據保留值即可確定色譜圖上哪個(ge) 峰是要分析的組分。定性時必須注意，在同一色譜柱上，不同化合物可能有相同的保留值，所以，對未知樣品的定性僅(jin) 僅(jin) 用一個(ge) 保留數據是不夠的，雙柱或多柱保留指數定性是GC中較為(wei) 可靠的方法，因為(wei) 不同的化合物在不同的色譜柱上具有相同保留值的幾率要小得多。
6、定量分析
要確定用什麽(me) 定量方法來測定待測組分的含量。常用的色譜定量方法不外乎峰麵積（峰高）百分比法、歸一化法、內(nei) 標法、外標法和標準加入法（又叫疊加法）。峰麵積（峰高）百分比法zui簡單，但zui不準確。隻有樣品由同係物組成、或者隻是為(wei) 了粗略地定量時該法才是可選擇的。相比而言，內(nei) 標法的定量精度zui高，因為(wei) 它是用相對於(yu) 標準物（叫內(nei) 標物）的響應值來定量的，而內(nei) 標物要分別加到標準樣品和未知樣品中，這樣就可抵消由於(yu) 操作條件（包括進樣量）的波動帶來的誤差。至於(yu) 標準加入法，是在未知樣品中定量加入待測物的標準品，然後根據峰麵積（或峰高）的增加量來進行定量計算。其樣品製備過程與(yu) 內(nei) 標法類似但計算原理則*是來自外標法。標準加入法定量精度應該介於(yu) 內(nei) 標法和外標法之間。
7、方法的驗證
所謂的方法驗證，就是要證明所開發方法的實用性和可靠性。實用性一般指所用儀(yi) 器配置是否全部可作為(wei) 商品購得，樣品處理方法是否簡單易操作，分析時間是否合理，分析成本是否可被同行接受等。可靠性則包括定量的線性範圍、檢測限、方法回收率、重複性、重現性和準確度等。
