色譜柱在使用前，進行柱的性能測試，並將結果保存起來，作為(wei) 今後評價(jia) 柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是*條件)，隻有這樣，測得的結果才有可比性。但要注意：柱性能可能由於(yu) 所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。
1、樣品的前處理
a、使用流動相溶解樣品。
b、使用預處理柱除去樣品中的強極性或與(yu) 柱填料產(chan) 生不可逆吸附的雜質。
c、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質。
2、流動相的配製
液相色譜是樣品組分在柱填料與(yu) 流動相之間質量交換而達到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點：
a、流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會(hui) 沉澱在柱中(或長時間保留在柱中)。
b、流動相與(yu) 樣品不產(chan) 生化學反應。
c、流動相的黏度要盡量小，以便得到好的分離效果；降低柱壓降，延長泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。
d、流動相的物化性質要與(yu) 使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器，使用對紫外吸收較低的溶劑配製。
e、流動相沸點不要太低，否則容易產(chan) 生氣泡，導致實驗無法進行。
f、在流動相配製好後，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體(ti) 既有利於(yu) 檢測，還可以防止流動相中的微量氧與(yu) 樣品發生作用。
3、流動相流速的選擇
因柱效是柱中流動相線性流速的函數，使用不同的流速可得到不同的柱效。對於(yu) 一根特定的色譜柱，要追求*柱效，使用*流速。對內(nei) 徑為(wei) 4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1ml/min，對於(yu) 內(nei) 徑為(wei) 4.0mm柱，流速0.8ml/min為(wei) 佳。
當選用*流速時，分析時間可能延長。可采用改變流動相的洗滌強度的方法以縮短分析時間(如使用反相柱時，可適當增加甲醇或乙腈的含量)。
注意：
a.含水流動相在實驗前配製，尤其是夏天使用緩衝(chong) 溶液作為(wei) 流動相不要過夜。加入*，防止細菌生長。
b.流動相要求使用0.45 μm濾膜過濾，除去微粒雜質。
c.使用HPLC級溶劑配製流動相，使用合適的流動相可延長色譜柱的使用壽命，提高柱性能。
